苯中毒是接觸苯蒸氣或液體所致的急性或慢性疾病。急性中毒以中樞神經系統的抑制作用為主要表現;慢性中毒則以造血系統損害為主要表現。
除苯作業人員外, 本標準也適用于接觸含苯的工業用甲苯、 二甲苯(但不包括純甲苯、二甲苯)等的作業人員。
1 診斷原則
根據短期大量或長期密切的職業接觸史(作業工齡一般在半年以上,如車間空氣中苯濃度明顯高于最高允許濃度時亦可不足半年),和以麻醉作用或造血系統損害為主的臨床表現,參考作業環境調查或現場空氣中苯濃度測定資料,進行綜合分析,排除其它疾病所引起的中樞神經功能改變或血象改變,方可診斷為急性或慢性苯中毒。
2 診斷及分級標準
2.1 觀察對象
常有頭暈、頭痛、乏力、失眠、記憶力減退等神經衰弱綜合征的表現。若檢查發現有以下改變之一種,在一個月內經過復查仍無變化者,可列為觀察對象:
a.白細胞數波動于4000~4500↑/立方毫米;
b.血小板數波動于8~10萬個/立方毫米,兼有出血傾向者。
2.2 慢性輕度中毒
除上述癥狀外,化驗檢查經過一段時間觀察,一般在1~3個月內檢查3次以上,白細胞數基本低于4000個/立方毫米 , 或中性粒細胞數基本低于2000個/立方毫米,可診斷為慢性輕度中毒。
白細胞數波動于4000~4500個/立方毫米,結合下列輔助指標之一種,亦可診斷為慢性輕度中毒:
a.血小板數低于8萬個/立方毫米,并伴有出血傾向;
b.中性粒細胞堿性磷酸酶活性明顯升高:按生化定量法大于120單位,或按組織化學法積分值大于60;
c.中性粒細胞胞漿中毒性顆粒明顯增多:積分值大于20或大于當地正常值。
2.3 慢性中度中毒
具有下列情況之一時,可診斷為慢性中度中毒:
a.白細胞數低于3000個/立方毫米,或中性粒細胞數低于1500個/立方毫米;
b.白細胞數低于4000個/立方毫米,血小板數低于6萬個/立方毫米,并有明顯出血傾向。
2.4 慢性重度中毒
經血象及骨髓象檢查,確定有再生障礙性貧血或白血病者,可診斷為慢性重度中毒。
2.5 急性中毒
在短期內吸入大量苯蒸氣,可迅速引起急性苯中毒。較輕者主要表現為興奮或酒醉狀態,伴有粘膜刺激癥狀,以及頭暈、頭痛、惡心、嘔吐、步態蹣跚等。嚴重時發生昏迷、抽搐、血壓下降,以至呼吸和循環衰竭。必要時可測定尿酚、血苯等,以明確診斷。
3 治療原則
3.1 慢性中毒
可用有助于造血功能恢復的藥物,并給予對癥治療。再生障礙性貧血或白血病的治療原則與內科相同。
3.2 急性中毒
應迅速將中毒患者移至新鮮空氣處,立即脫去被苯污染的衣服,用肥皂水清洗被污染的皮膚,注意保溫。急性期應注意臥床休息。急救原則與內科相同,可用葡萄糖醛酸,忌用腎上腺素。
4 勞動能力鑒定 4.1 觀察對象
應注意觀察血象的動態變化,并根據病情變化趨勢,給予適當處理。
4.2 慢性中毒
一經確定診斷,即應調離接觸苯及其它有毒物質的工作。發給診斷證明書時,對接觸苯者診斷為苯中毒; 對接觸含苯的甲苯、 二甲苯等者診斷為含苯化學物中毒。在患病期間,并應分別不同情況進行安排。
4.2.1 輕度中毒
一般可從事輕工作,或半日工作。
4.2.2 中度中毒
根據病情,適當安排休息。
4.2.3 重度中毒
全休。
4.3 急性中毒
病情恢復后,一般休息3~7天即可工作。病情較重者,休息時間可適當延長。
5 健康檢查的要求
5.1 苯作業工人應作就業前體檢,并每年定期體檢一次。
5.2 體檢時,必須作內科檢查、白細胞計數和血紅蛋白定量。必要時可作血小板計數、白細胞分類計數和骨髓象檢查等項目。
5.3 有條件的單位,可作中性粒細胞堿性磷酸酶活性測定,或中性粒細胞胞漿毒性顆粒計數等檢查項目。
6 職業禁忌證
a.就業前體檢時,血象指標低于或接近正常值下限者;
b.各種血液病;
c.嚴重的全身性皮膚病;
d.月經過多或功能性子宮出血。
附 錄 A 白細胞計數法(試管法)(補充件)
A.1 原理
用稀乙酸將血液稀釋20倍,使紅細胞全部溶解,滴入白細胞計數池中,在顯微鏡下計數,求得每立方毫米血液中的白細胞數。
A.2 器材和試劑
A.2.1 器材
生物顯微鏡、Neubauer氏血細胞計數池、0.02ml吸管、小試管、刺血針、2ml吸管。
A.2.2 試劑
白細胞稀釋液:采用3%乙酸溶液。
A.3 稀釋液的配制
采用3%乙酸溶液。即取冰乙酸3ml,加蒸餾水至100ml混合。亦可于上述稀釋液中加美藍或龍膽紫液1~2滴,便于觀察。稀釋液應經常過濾,以除去塵埃、異物或微生物的影響。
A.4 方法
A.4.1 取血
于小試管中加入稀釋液 0.38ml , 然后用血紅蛋白吸管自耳垂或手指取血0.02ml,立即吹入稀釋液中,并將吸管壁的血洗入稀釋液內,輕輕搖勻。
A.4.2 計數
用小滴管自上述搖勻的稀釋液中吸取少量液體加入血細胞計數池內 , 靜置1~2分鐘,在顯微鏡下用低倍鏡計數4個大方格的白細胞總數,然后將該數乘以50,即得每立方毫米的白細胞數。
附 錄 B 血小板計數法(直接試管法)(補充件)
B.1 原理
用一種能破壞血液中的紅細胞,但能保護血小板形態完整的稀釋液稀釋血液,滴入血細胞計數池,在高倍鏡下直接計數血小板數。
B.2 器材和試劑
器材同白細胞計數法。稀釋液用許汝和氏尿素稀釋液。許汝和氏尿素稀釋液配制法:尿素10g, 福爾馬林0.1ml, 枸櫞酸鈉0.5g,加水至100ml,溶解后過慮,在冰箱內保存。
B.3 操作步驟
a.用2ml吸管準確吸取血小板稀釋液0.38ml置小試管中。
b.從耳垂采血,用0.02ml吸管準確吸取第一滴血,吹入稀釋液中,并吹吸兩次洗凈吸管壁內的血。
c.充分振搖,滴入計數池,靜置15~20分鐘,使血小板下沉,以便計數。
d.在高倍鏡下用計數紅細胞所用的5個中方格中的血小板數,乘以1000,即得每立方毫米血中血小板數。
e.血小板在稀釋液中表現為富于折光之小點,約為紅細胞的1/2~1/3大小。
B.4 注意事項
a.取血時動作要迅速,穿刺要深。
b.一定要用第一滴血,以使血小板保持完整,在稀釋液中易于分散。否則,血小板因耳垂受擠壓而破壞較多,形態也不規則,在稀釋液中不易分散,這樣,會使計數結果偏低。
c.尿素在室溫中容易分散而失效,故稀釋液盡可能小量配制,并保存于冰箱之中。
d.如紅細胞不完全溶解,影響血小板計數的準確性時,可加大稀釋倍數,或另換稀釋液。
e.如室溫較高時,可將滴好的計數池放在培養皿下,中間放一濕棉球,以防計數池中的稀釋液干掉。
附 錄 C 中性粒細胞堿性磷酸酶活性定量測定法(補充件)
C.1 原理
中性粒細胞中的堿性磷酸酶(簡稱堿酶)在一定條件下能使β-甘油磷酸鈉水解釋出無機磷, 后者與鉬酸試劑結合成磷鉬酸復合物, 再以氨基萘酚磺酸還原為鉬藍而呈現藍色,用光電比色法求得所釋放的無機磷含量,表示酶的活性。
C.2 試劑
a.葡聚糖:分子量20萬,用生理鹽水配制成2%溶液,在冰箱中可保存一個月。
b.β-甘油磷酸鈉溶液(0.026M):稱取β-甘油磷酸鈉溶于碳酸—重碳酸鹽緩沖溶液,將pH調至9.9,液面蓋一層石油醚,在冰箱內保存。
c.碳酸-重碳酸鹽緩沖液:
A液 稱取無水碳酸鈉2.12g,溶于重蒸餾水100ml,配成0.2M無水碳酸鈉溶液。
B液 稱取碳酸氫鈉1.68g,溶于重蒸餾水100ml,配成0.2M碳酸氫鈉溶液。
取A液100ml與B液100ml混合,加重蒸餾水600ml,pH為9.9。
d.皂素:用生理鹽水配成2%溶液。
e.氯化鎂溶液(0.05M):用重蒸餾水配成。
f.三氯乙酸溶液:用重蒸餾水配成50%及5%二種濃度。
g.鉬酸銨溶液:稱取鉬酸銨12.50g,溶于重蒸餾水100ml,加10M硫酸150ml,再加重蒸餾水到500ml。
h.0.25%氨基萘酚磺酸溶液:稱取氨基萘酚磺酸0.0625g、亞硫酸氫鈉1.33g、亞硫酸鈉0.25g,于研缽中磨成細粉,加重蒸餾水到25ml,過濾后保存于冰箱內。用時稀釋一倍。
i.標準磷儲備液(每毫升含無機磷1mg): 稱取干燥恒重的分析純磷酸二氫鉀2.1971g置于容量瓶中,加重蒸餾水至500ml,加氯仿2滴,在冰箱內保存。
j.肝素:用生理鹽水配成1%溶液。
C.3實驗方法
C.3.1 白細胞分離
自耳垂或手指取血0.15ml,置于預先準備好的含1滴肝素和0.30ml葡聚糖溶液的微量試管中,用手振搖混勻,靜置10分鐘。待紅細胞沉降界面清晰時,小心吸出上層懸浮液,置于小離心管中,加入2倍生理鹽水,搖勻后離心(2500轉/分鐘)8分鐘。取出上清液棄去,保留沉淀。再向有沉淀的離心管加生理鹽水2ml,混勻,再離心8分鐘。重復2次,棄去上清液,管中留下液體約0.15ml,與沉淀混勻,即為白細胞懸浮液, 作白細胞計數2~4次,取其
平均值。 此白細胞懸浮液供酶活性測定之用。如不能立即測定,需放置冰箱內,
但必須在當天測定。
C.3.2 白細胞堿酶活性的測定
取一小試管, 加入β—甘油磷酸鈉 0.85ml , 皂素 0.05ml,
氯化鎂0.02ml,于37℃水浴中預熱5分鐘,然后準確加入白細胞懸浮液0.05ml,混勻, 繼續保溫60分鐘,到時立即加入50%三氯乙酸0.15
ml使反應終止, 以2500轉/分離心10分鐘,除去沉淀。
每個樣品都需作對照管測定,對照管所加內容物同上,僅白細胞懸浮液須在保溫后加50%三氯乙酸后加入。
分別取樣品和對照管上清液0.80ml,各加入鉬酸銨試劑0.15ml,氨基萘酚磺酸溶液0.10ml,重蒸餾水1.45ml,顯色20分鐘,用分光光度計測定光密度( 所用波長為660nm、比色杯厚10mm ),分別讀取樣品管、對照管的光密度。每管重復讀數兩次,取其平均值。
C.3.3 磷標準曲線的制定
取標準磷儲備液, 用5%三氯乙酸稀釋成不同濃度的標準磷應用液, 濃度分別為:1.0,3.0,5.0,7.5,10.0mg/1。然后取試管5支,分別在每一試管加入1.0ml上述標準磷應用液之一種, 以及鉬酸銨0.15
ml, 氨基萘酚磺酸0.10ml,重蒸餾水1.25ml,按上法顯色,讀取
各管的光密度,繪制標準曲線圖。
C.3.4 白細胞分類計數
在取血分離白細胞的同時,取1滴血作涂片,瑞氏染色,按常規分類計數嗜中性白細胞的百分比。
C.3.5 計算方法
白細胞堿酶活性用單位表示,以每十億個中性白細胞在37℃條件下,1小時釋放出1mg無機磷為一個單位。計算公式如下:
酶活性(單位)={〔pi(樣)—pi(對)〕×10000×1.40}÷(W·V·N)
式中:pi(樣)——樣品管無機磷,μg;
pi(對)——對照管無機磷,μg;
W——白細胞懸液的白細胞數,個/立方毫米;
V——酶反應所加入白細胞懸液的量,ml;
N——嗜中性白細胞,%。
注:為減少操作誤差,提高結果準確性,也可自靜脈采血1.5ml,按常量法進行操作。詳見《衛生研究》5(6):481,1976。
C.4 注意事項
a.白細胞懸液必須充分搖勻,不應有聚集的細胞。白細胞計數要準確,一般應計數2~4次,取平均值。
b.堿酶活性測定中,白細胞懸液的加入量要準確,吸取時注意搖勻。
c.堿酶反應保溫時間(60分鐘)要準確。
d.顯色反應不應出現沉淀。
e.用分光光度計讀數時,樣品管與對照管都應重復兩次。
附 錄 D 中性粒細胞堿性磷酸酶活性組織化學檢查法(補充件)
D.1 試劑
a.固定液:加甲醛10ml于無水甲醇90ml中。
b.緩沖底質液(須臨用時配制):由10%巴比妥鈉30ml、3.2%β-甘油磷酸鈉30ml、M/10硫酸鎂30ml、2%硝酸鈣45ml及蒸餾水165ml配成。
c.清洗液:在蒸餾水中加幾滴2%硝酸鈣液。
d.2%硝酸鈷。
e.稀硫化銨液:硫化銨1ml加水至80ml。
f.2%堿性藏紅水溶液。
D.2 方法
a.指端取血推片,不宜太薄。
b.迅速將血片置固定液中固定30秒,然后用清洗液洗數秒鐘。
c.將已固定的血片放于緩沖底質液內,在37℃水浴中保溫2小時,然后用清洗液洗數秒鐘。
d.將上述血片依次放入2%硝酸鈷液中5分鐘,用清洗液洗凈,然后移于稀硫化銨液中1分鐘,用清洗液洗凈,最后用2%堿性藏紅水溶液染色16秒,用水洗凈,待干,用顯微鏡油鏡觀察結果。
D.3 計救方法
共計數100個中性粒細胞,視其細胞內堿性磷酸酶活力強弱,按Kaplow法五級記分表示。將每級陽性細胞百分比乘以各該級的分數所得分數之和,即為堿性磷酸酶的積分。分級的標準如下:
a.中性粒細胞胞漿無異常著色或顆粒,為0分。
b.胞漿內呈彌散的淺棕色,或少許細微顆粒,為1分。
c.胞漿內有棕色散在顆粒,為2分。
d.胞漿內有分布不均勻的棕黑色顆粒,為3分。
e.胞漿內充滿了均勻一致的棕黑色顆粒,或塊狀沉淀,為4分。
附 錄 E 中性粒細胞中毒性顆粒檢查法(補充件)
E.1 試劑
a.固定液:甲醇。
b.磷酸鹽緩沖液:1%磷酸二氫鉀30ml,1%無水磷酸氫二鈉20ml,用蒸餾水加至100m1。
c.姬姆薩染色液: 由姬姆薩氏染粉 0.50g、 甘油 33.00ml及甲醇33.00ml配成。先溶解姬姆薩氏染粉于甘油內,置于60℃水溫箱內2小時,再加入甲醇,混合即可。
E.2 方法
從耳垂取血涂片,要求血片均勻,不能過厚。片上涂一薄層甲醇,使血片固定,但不要滴加過多的甲醇,以免使白細胞胞漿凝聚,影響中毒性顆粒的觀察。待片干后,以新配的稀釋姬姆薩染液染色15~20分鐘,然后用水沖洗,在室溫下待干,用顯微鏡油鏡觀察結果。
E.3 計算方法
共觀察100個中性粒細胞,其細胞漿內出現深紫色異常顆粒者為中毒性顆粒。根據顆粒的粗細和多少可將其分成五級記分,計算其總和即為積分值。分級標準如下:
a.細胞漿未見中毒性顆粒者,為0分。
b.細胞漿中毒性顆粒較細、數量較少者,為1分。
c.細胞漿中毒性顆粒較細、數量較多者,為2分。
d.細胞漿中毒性顆粒以粗粒居多者,為3分。
e.粗大的中毒性顆粒滿布于胞漿者,為4分。
附 錄 F 正確使用標準的說明(參考件)
F.1 本標準的適用范圍
根據全國普查的資料,各種苯及工業用甲苯、二甲苯作業場所的一次性測定結果,有76%的空氣樣品是測出苯的。而且不少目前接觸甲苯、二甲苯的老工人,過去曾接觸過苯。故接觸工業用甲苯、二甲苯的工人出現苯中毒表現時,可按本標準處理。接觸化學純甲苯、二甲苯,且過去肯定無接觸苯歷史者,不按本標準處理。
F.2 關于慢性苯中毒的診斷
F.2.1 輕度中毒
主要化驗依據是白細胞數基本低于4000個/立方毫米,或中性粒細胞數基本低于2000個/立方毫米。白細胞數波動于4000~5000/立方毫米者,根據各地情況,結合三種輔助指標之一種,也可以診斷。對中毒診斷所要求的中性粒細胞堿性磷酸酶活性或中毒性顆粒積分的數值供參考用 , 必要時也可根據本地區足夠數量的正常值來判斷。
F.2.2 中度和重度中毒
一般應在輕度中毒的基礎上逐步發展而成。但標準中沒有提出此點,原因是考慮到有些中毒病人可能沒有系統的體檢或臨床病歷資料,在初次體檢或就診時就已達到中毒或重度中毒的標準。在這種情況下,不能由于缺乏以前的臨床資料而不予診斷。
診斷為再生障礙性貧血或白血病的依據,與內科相同。
附加說明:
本標準由全國衛生標準技術委員會職業病診斷標準分委員會提出。
本標準由中國醫學科學院衛生研究所負責起草。
自本標準實施之日起,原衛生部《苯中毒診斷標準及處理原則》作廢。
本標準由衛生部衛生防疫司負責解釋。